将按偏头看了韩野一眼,韩野也在看他。
两个人的眼神里同时浮现疑问:他怎么可以这么熟练?
像是做过几百次的熟练感。
“王晔,你过来练。”张沐晨把小鼠从定位仪上取下来,退开半步,“先练固定。”
王晔点点头,站到定位仪前。
张沐晨:“小鼠的头部要固定在水平位,不能偏左,不能偏右。鼻夹松紧以不压气管为准。观察腹部起伏,有节奏的呼吸,没有憋气,没有吱吱叫。”
王晔按着,松了一点,又紧了一下。小鼠没有挣扎。
“可以了。”张沐晨说。
王晔呼出一口气。
“好,我现在演示开颅。颅骨钻转速调到20,000转,生理盐水持续滴注降温。从Bregma点开始,先标记骨窗边界。看到矢状缝和中缝十字交叉点了吗?那是Bregma。以它为原点,向右2.5毫米,向后1.5毫米,画十字。”
钻头落下,骨屑飞溅,随后被生理盐水冲走。
张沐晨沿着标记线的边缘走了一圈,骨片微微翘起。他用镊子尖轻轻一挑,骨片脱离,硬脑膜暴露出来。银白色,没有破损,没有出血。
“就这样操作。”张沐晨偏头看向林柔,“林柔,过来做接下来操作。”
林柔抿了下唇,走过来。
说实话,给小鼠开颅是一个很血腥的过程。虽然颅骨钻磨骨的时候只有微量渗血,但骨头磨开之后看到的景象是的硬脑膜和粉白色的血管搏动脑组织。
这种直面生命中枢的画面对林柔的心理有着极大的冲击。
作为大三本科生,林柔几乎没有接触过这种实验。但对于一个以后想要踏上神经领域的人来说,这是绕不过去的必修课。
要做到熟视无睹才算合格。
张沐晨把微量注射器递给她:“尾静脉注射玫瑰红,剂量20毫克每公斤。然后激光照射。轻度组30秒,中度组90秒,重度组180秒。损伤完成之后缝合头皮,放回笼子。24小时后注射FITC-dextran,再过2小时灌流取材。”
林柔接过注射器,手指微微收紧。
“从尾尖三分之一处进针,针头斜面朝上,角度小一点。见回血再推。”张沐晨指导道。
林柔深吸一口气,针尖刺入皮肤。没有回血。拔出来,重新找位置。第二次,暗红色的血液顺着针管回流了一点。她屏住呼吸,缓慢推注。药液进入血管,没有鼓起皮丘,也没有阻力。
“可以。”张沐晨说。
林柔松开注射器。小鼠的眼睛、尾巴、爪子开始变成淡淡的粉红色。这是光敏剂在全身循环的效果。
张沐晨把532nm激光器拉到骨窗正上方,光斑对准Bregma后方1.5毫米、中缝外侧2.5毫米的坐标点。
他偏头看了林柔一眼:“继续。”
林柔站到激光器控制面板前。屏幕上跳动着三个预设程序:30秒、90秒、180秒。
“90秒?”她问。
“嗯。”
激光启动,绿色的光点落在硬脑膜上。90秒后,激光自动关闭,硬脑膜上没有焦痕,没有出血。
一直在看着的韩野和蒋然知道,激光激活了玫瑰红产生活性氧,正在靶向损伤周细胞。
“'妈的,太牛逼了。”韩野和蒋然心里暗叹。
一个本科生对立体定位仪的熟悉程度不输研三,调激光器更是手拿把掐。
之前他们觉得张沐晨在装逼,现在发现他不是在装,他是真的会。
“庄小菲。”张沐晨喊了一声。
“啊?”庄小菲抬头。
“你负责记录实验数据。今天的日期、小鼠编号、分组、坐标参数、激光功率、损伤时间,每台设备的运行参数。以后写论文的时候这些数据缺一个都没办法回溯。”
庄小菲赶紧翻开笔记本,在第一行写下日期:2008年10月......
张沐晨给小鼠缝合头皮,完成后看了一眼墙上的挂钟:“24小时后注射FITC-dextran。现在是下午三点。明天下午三点准时注射。”
张沐晨走到小鼠笼边,把刚做完光栓的那只小鼠放回去。小鼠蜷在笼角,鼻子轻轻抽动,胡须一颤一颤的。
刚被开颅、被激光照射、被缝合头皮,但它活着。呼吸平稳。
“明天的注射是整个实验最难的一环。”张沐晨看向几个人,“小鼠注射过玫瑰红,尾静脉穿刺会造成局部炎症和微小血栓,光敏剂对血管壁也有刺激。所以小鼠的静脉会红肿、僵硬、管腔狭窄。第二次注射只能靠手感。”
“温水浸泡或酒精擦拭可以让血管扩张,但这个节段已经硬化了,扩张有限。所以进针角度要比平时大一点,穿透皮肤后稍微上挑就是进到管腔了。”
韩野和蒋然对视了一眼,眼神里是藏不住的惊叹。
蒋然咽了口唾沫,开口提问道:“学弟,我以前做这一步的时候明明感觉针扎进去了,但一推药,小鼠经常会出现剧烈的抽搐,几秒钟内就当场猝死,这是为什么?”
张沐晨:“推得太快或者分子量计算错误。40kDa的FITC-dextran很黏稠,血管硬化后管腔狭窄。如果像注射普通生理盐水那样会导致小鼠脑部血液回流受阻,颅内压暴增,诱发急性脑疝。所以标准做法是全程匀速慢推,控制在20到30秒。”
蒋然如认真的点点头。
这时,韩野也紧凑了过来,虚心求教道:“学弟,FITC-dextran注射后循环多久灌流?不同分子量的时间不一样,40kDa怎么定?”
“30到60分钟。40kDa介于4kDa和150kDa之间。时间短了渗漏面积不够,时间长了背景太高。文献上是30分钟起,我们可以做到45分钟。”
韩野点了点头,在笔记本上写下要点。
林柔和庄小菲也提了几个问题,张沐晨都一一解答。
一时间,实验室所有人都围在张沐晨身边。
这时,实验室的门被推开,李芳然走进来。
一进屋,他就看到实验台前围的满满当当,自己的两个硕士生躬着腰做笔记。
李芳然有些奇怪的走上前:“韩野,蒋然。你俩教得怎么样了?仪器设备都教明白了吧?”
韩野抬起头看了张沐晨一眼,又看了一眼李芳然:“老师,学弟不用我们教。反而是学弟在教我们。”
李芳然:?
倒反天罡?
.....
第28章 泌尿外科
李芳然站在实验台边,目光从激光共聚焦移到立体定位仪,又从立体定位仪移到小鼠笼。笼子里那只刚做完光栓的小鼠蜷在角落,鼻尖轻轻抽动。头皮上的缝合线整整齐齐,三针,针距均匀,打结力度合适,皮缘对合严丝合缝。
她看了几秒。
缝合是基本功,但能把基本功练到这个程度的本科生她没见过。
李芳然看向张沐晨:“你是怎么做到的?”
张沐晨:“多练。”
李芳然转身看向韩野和蒋然:“听到没,你们也多练。”
韩野和蒋然对视一眼,纷纷咂嘴。
李芳然就差说他们菜了。
......
张沐晨在实验台前又耐心的教了几轮,确认所有细节和参数都教到位后便退开半步,将操作权交给了几位组员。
接下来的时间,王晔、林柔和庄小菲三个人开始了实操。
刚开始的时候,大家因为缺乏经验动作生涩。王晔握钻的手会不自觉用力,林柔调焦时多转两圈才能找到清晰平面。但随着时间的推移,王晔最先展现出天赋。
他落钻稳,走线快,骨窗边界干净利落,几乎没有锯齿状的毛边。同样是独立操作,他给小鼠开颅的速度和质量明显比另外两个人高出一截。
林柔也在慢慢适应。最初看到488纳米荧光下那片粉白色、带着血管搏动的活体脑组织时,她的手指会不自觉的僵硬。但现在她的心跳平稳,眼神里的闪烁也消失了,取而代之的是一种平静。
庄小菲慢一些,但每一步都在进步。
张沐晨站在实验台边,目光从三个人身上依次扫过。
这就是他要的团队。每个人不一定是天才,但每个人都要在自己的位置上做到及格、做到稳定。王晔有天赋,林柔有悟性,而庄小菲则是持之以恒的韧性。
此时,张沐晨正站在实验室角落的打印机前,机器嗡嗡地响了几声,吐出一张A4纸。他拿起纸折了一下,放在桌上。
李芳然抬头看了一眼:“这是什么表?”
“大学生临床技能竞赛报名表。”张沐晨把纸翻到正面。
李芳然愣了一下:“你要参加这个比赛?”
“嗯。沈老师让我参加的。”
“沈老师?沈景山?”
“是的。”
李芳然转过头,看向实验台旁边的韩野:“我记得你本科也参加过这个比赛吧?”
韩野脸上的表情不太自然:“参……参加过。”
“拿了什么名次?”
韩野抿了抿嘴,小声道:“初赛就被刷下来了。”
李芳然的目光转向蒋然。
蒋然立刻拉长人中,抿住嘴,眼神里写满了“老师您别问我”。
“老师,他连参加都没参加。”韩野在旁边补充道。
虽然我已经丢人了,但不能只有我一个人丢人。
好兄弟这一块。
实验室里安静了一瞬,庄小菲和林柔忍不住抿着嘴偷偷笑了起来。
李芳然看着这两个活宝,叹了口气。
以前她觉得自己带的这两个研究生虽说不是拔尖,但好歹底子扎实,干活也勤快。可今天和张沐晨往这一站,一比,简直被全方位秒杀。
人比人气死人。
李芳然深深看了张沐晨一眼,她真想把这个学生收进自己的组。可惜啊,人家早就被沈景山给收编了。
收回有思绪,李芳然转过身将目光投向了正在实验台前忙碌的三个背影。
既然张沐晨挖不动,但他带过来的这几个人也挺不错。
“你们三个,都选好以后的导师了吗?”李芳然双手插在白大褂的兜里,语气温和的问道。
听到这话,王晔第一个转过头来,有些不好意思地挠了挠后脑勺,憨笑道:“我进了邹老师的课题组,师娘。”
听到这声师娘,李芳然先是愣了一下,随后露出一个温和的笑容:“原来你进了老邹的组啊。”
“没错师娘。”
“嗯,你呢?”李芳然把目光投向林柔。
林柔手指微微捏紧:“李老师,我其实一直都很想加入您的课题组。”
李芳然看着眼前这个眼神清澈的姑娘,笑着点了点头:“嗯,我进来的时候就注意到你了。刚才看你调校488通道和激光光强的操作,上手很快,心思也细腻。如果你对脑微循环和血脑屏障这个方向感兴趣,可与来我的组。”
“谢谢李老师!”林柔顿时喜上眉梢。